C'est le 5 août 1941 qu'Elisabeth Guignot voit le jour à Paris. Elle commence sa carrière d'actrice à la télévision dans la série Noële aux quatre vents réalisée par Henri Colpi en 1970. Cette même année, elle épouse Gérard Depardieu, rencontré dans un cours de théâtre. Elle enchaîne avec un téléfilm de Jean-Claude Bonnardot, Les Aventures de Zadig (1970), mais c'est seulement en 1984 qu'elle se voit enfin donner un rôle au cinéma. Ce rôle, elle le doit à son mari, réalisateur de l'adaptation de la pièce Le Tartuffe. Puis, Elisabeth Depardieu partage l'affiche avec Michel Serrault et Charlotte Rampling, dans le film policier On ne meurt que deux fois (1985) de Jacques Derray.
L'année suivante, elle crève l'écran dans Jean de Florette, adaptation d'un roman de Marcel Pagnol par Claude Berri, aux côtés d'Yves Montand. Dans les années 1990, on l'aperçoit au cinéma dans Le Garçu de Maurice Pialat ou encore Les Aveux de l'innocent de Jean-Pierre Améris. Sa dernière apparition remonte à 2002 dans le film Mischka de Jean-François Stévenin. Cette année-là marque aussi la fin de sa carrière d'actrice, au théâtre comme au cinéma.
Côté vie privée, le divorce du couple Depardieu est acté en 2006, plusieursa nnées après leur séparation. Elle est la mère de l'actrice Julie Depardieu (née en 1973) et de Guillaume Depardieu (né en 1971 et décédé en 2008).