Shirley Bousquet est née le 5 mars 1976 à Colombes dans les Hauts-de-Seine. Fille d’un skipper, la petite fille est très sportive et commence très jeune les cours de danse. Elle prend goût à la scène et plus tard joue des sketches avec ses copines devant ses parents. A 12 ans, elle s’inscrit à des cours de théâtre et c’est une révélation pour la jeune fille.
A 15 ans, Shirley Bousquet se fait remarquer par une compagnie de théâtre, Les Saltimbanques, qui lui propose de rejoindre la troupe. Elle accepte et entame une carrière professionnelle. Pendant cinq ans, elle foule les planches et se forme au métier de comédienne. Elle rejoint également la Ligue d’improvisation et complète sa formation.
La jeune comédienne souhaite élargir sa palette de jeu et commence à écumer les castings pour le petit écran. En 1998, après quelques apparitions dans la série Les années fac, elle décroche un rôle dans la série de TF1, Sous le soleil, et incarne Jeanne Bouvier jusqu’en 2003. A partir de 2002, c’est la série Caméra Café, diffusée sur M6, et le rôle de Nancy, qui va la révéler au grand public. Puis, elle intègre la Bern Academie sur Canal+, qui intervient dans l’émission de Stéphane Bern 20h10 pétantes, et fait des sketches aux côtés de Florence Foresti.
Parallèlement, au cinéma, l’actrice débute avec une apparition dans Taxi 2, en 2000. En 2002, Olivier Marchal lui confie un rôle dans le film policier Gangsters. En 2005, elle retrouve Bruno Solo et Yvan Le Bolloc’h pour l’adaptation cinématographique de la série Caméra Café; Espace détente. Sa carrière lancée, l’actrice enchaîne les films en 2006; Incontrôlable, Hell et Nos amis les terriens.
Depuis, Shirley Bousquet alterne les rôles entre le cinéma et la télévision; en 2009, elle rejoint la série Mes amis, mes amours, mes emmerdes puis la série Victoire Bonnot en 2010, et apparaît en guest dans la série Scènes de ménages en 2016. Sur grand écran, elle varie les registres; L’amour c’est mieux à deux (2010), Omar m’a tuer (2011), Plan de table (2012), A deux heures de Paris (2018).
Côté vie privée, en mai 2018, Shirley Bousquet annonce sur les réseaux sociaux attendre un enfant avec son compagnon Charles Watine. Le 21 juin 2018, elle donne naissance à un petit garçon prénommé Sören.